"ИСПОЛЬЗОВАНИЕ МЕТОДА ИЗМЕРЕНИЯ ЭЛЕКТРИЧЕСКОГО СОПРОТИВЛЕНИЯ (ИМПЕДАНСА) ДЛЯ САНИТАРНО-МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ ПИТЬЕВОЙ ВОДЫ. 4.2. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. БИОЛОГИЧЕСКИЕ И МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ. МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ МУК 4.2.1111-02" (утв. Главным государственным санитарным врачом от 26.02.2002)
4.4. Прямой метод определения колифагов
Определение колифагов в воде проводится в измерительных ячейках объемом 100 мл.
1. Среда BiMedia 001A десятикратной концентрации <*>.
<*> Для приготовления концентрированной среды навеска сухого препарата среды увеличивается в 10 раз, а объем дистиллированной воды остается прежним.
2. Протокол измерения.
2.1. Установить температуру 37 °C на приборе "Бак Трак".
2.2. Установить в основном меню программы прибора параметры.
Параметры для инкубаторного блока (Adjust parameters):
Время исследования (Duration) - 24 ч.
Масштаб измерений (Scale):
- М-параметр 0 - 50%;
- Е-параметр 0 - 50%.
Время задержки (Delay) - 1 ч.
Пороговые значения (Thresholds):
- М-параметр 5%;
- Е-параметр 10%.
Учет результатов проводится по М-параметру.
3. Отфильтровать 100 мл исследуемой пробы воды через фильтр для микробиологических целей с диаметром пор не более 0,45 мкм.
4. Фильтрат поместить в измерительную ячейку с 10 мл концентрированной среды BiMedia 001A.
5. Внести 1 мл, 0,1 мл и 0,01 мл свежей ночной культуры чувствительного к фагу штамма Е.coli <*> в измерительные ячейки с отфильтрованными образцами воды.
<*> Наименование тест-культуры и подготовка ее для использования в методике определения колифагов указаны в соответствующих разделах МУК 4.2.1018-01 "Санитарно-микробиологический анализ питьевой воды".
6. Для контроля использовать измерительные ячейки со 100 мл стерильной воды + 10 мл концентрированной среды BiMedia 001A + ночная культура чувствительного к фагу штамма Е.coli (1 мл, 0,1 мл, 0,01 мл).
7. Выбрать в основном меню программы ЗАПУСК ИЗМЕРЕНИЙ (START MEASUREMENT) и начать измерение.
8. После того, как каждая позиция блока будет отмаркирована как свободная на экране монитора, поместить измерительные ячейки в прибор "Бак Трак".
Измерение начнется автоматически через 1 час после загрузки ячеек в прибор.
9. Оценка результатов:
- при отсутствии колифагов в воде время детекции импеданса (IDT) будет одинаковым как для исследуемого, так и для контрольного образца (при сравнении одинакового количества внесенной культуры Е.coli);
- при наличии колифагов в воде время детекции импеданса (IDT) для исследуемых образцов будет больше по сравнению с контролем (при сравнении одинакового количества внесенной культуры Е.coli). Изменится также форма кривой импедансного сигнала.
Примечание. Использование различных количеств тест-культуры Е.coli рекомендуется только для начального этапа отработки и нахождения оптимальной плотности культуры. В дальнейших исследованиях возможно использование лишь оптимального количества вносимой культуры. Рекомендуется не превышать показатель 100 - 1000 клеток Е.coli в измерительной ячейке.