"ИСПОЛЬЗОВАНИЕ МЕТОДА ИЗМЕРЕНИЯ ЭЛЕКТРИЧЕСКОГО СОПРОТИВЛЕНИЯ (ИМПЕДАНСА) ДЛЯ САНИТАРНО-МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ ПИТЬЕВОЙ ВОДЫ. 4.2. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. БИОЛОГИЧЕСКИЕ И МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ. МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ МУК 4.2.1111-02" (утв. Главным государственным санитарным врачом от 26.02.2002)
6. Питательные среды: назначение, приготовление, использование
Питательные среды, используемые в импедансной микробиологии, специально разработаны фирмой SY-LAB (Австрия) <*> для системы "Бак Трак". Селективность фирменных питательных сред позволяет определять микробиологические показатели качества питьевой воды систем централизованного водоснабжения в соответствии с требованиями СанПиН 2.1.4.1074-01 "Питьевая вода. Гигиенические требования к качеству воды централизованных систем питьевого водоснабжения. Контроль качества".
<*> Питательные среды BiMedia 001A и BiMedia 160B выпускаются также отделением питательных сред Государственного научного центра прикладной микробиологии (Московская область, г. Оболенск).
Эти среды обладают всеми свойствами, необходимыми для измерения импеданса:
- ровная базовая линия с небольшим или нулевым дрейфом или шумом в присутствии инокулюма;
- высокая начальная скорость изменения электрического сигнала, дающая резкий перегиб в точке определения;
- большая величина тотальных электрических изменений.
Для санитарно-микробиологического анализа питьевой воды используются следующие питательные среды:
- BiMedia 001A - для определения общего числа микроорганизмов;
- BiMedia 160B и 160C - для определения колиформных бактерий;
- BiMedia 660A - для определения сульфитредуцирующих клостридий.
6.1. Приготовление сред6.1.1. BiMedia 001A - для определения мезофильных аэробных и факультативно анаэробных микроорганизмов (общее число микроорганизмов) и BiMedia 160B - для определения колиформных бактерий (общих и термотолерантных):
- растворить необходимое количество среды в дистиллированной воде (соотношение указано на упаковке);
- разделить приготовленную среду на порции и автоклавировать при 1 атм. 15 мин.;
- после стерилизации среда должна уравновеситься при комнатной температуре в течение 6 ч.
Примечание. Приготовленная среда должна храниться при температуре 4 °C. Срок хранения - 3 недели. Изменение режима стерилизации (более продолжительное автоклавирование) снижает качество среды!
6.1.2. Приготовление среды BiMedia 660A - для определения сульфитредуцирующих клостридий:
- растворить все содержимое упаковки в дистиллированной воде (конечный объем - 1,2 или 5 л указан на этикетке);
- проверить pH среды и, если необходимо, довести до 7,1 +/- 0,1;
- разлить приготовленную среду на порции и стерилизовать при 1 атм. 15 мин.;
- дать среде уравновеситься в течение 12 ч при комнатной температуре перед использованием;
- внести по 9 мл среды в стерильные измерительные ячейки и поместить ячейки в штатив;
- прогреть измерительные ячейки (с приоткрытыми крышками) при 95 - 100 °C на пару в течение 15 мин. (для удаления растворенного в среде кислорода);
- дать среде остыть до 50 °C (или меньше), затем можно добавлять аддитив;
- добавить во флакон с Аддитивом 660A 1,5 мл стерильной дистиллированной воды;
- добавить по 30 мкл раствора аддитива в каждую измерительную ячейку с 9 мл среды.
Для предотвращения образования воздушных пузырьков не погружайте наконечники пипетки в среду.
Примечание. Аддитив необходимо добавлять только непосредственно перед использованием среды. Хранить аддитив при 4 °C.
Растворы аддитивов следует хранить не более 2 недель.
Приготовленная среда должна храниться при 4 °C не более 2 недель.
Длительное прогревание и обработка при температуре выше рекомендуемой снижают качество среды!