"МЕТОДЫ ВЫЯВЛЕНИЯ И ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПАРАГЕМОЛИТИЧЕСКИХ ВИБРИОНОВ В РЫБЕ, НЕРЫБНЫХ ОБЪЕКТАХ ПРОМЫСЛА, ПРОДУКТАХ, ВЫРАБАТЫВАЕМЫХ ИЗ НИХ, ВОДЕ ПОВЕРХНОСТНЫХ ВОДОЕМОВ И ДРУГИХ ОБЪЕКТАХ. МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ. МУК 4.2.2046-06" (утв. Роспотребнадзором 30.01.2006)

7.3. Контроль питательных сред для выделения парагемолитических вибрионов

Контроль питательных сред и ингибиторов роста посторонней микрофлоры проводят в соответствии с "Инструкцией по бактериологическому контролю диагностических питательных сред для холерного вибриона" 1983 г., утв. Начальником Главного управления карантинных инфекций МЗ СССР, используя вместо тест-штаммов холерного вибриона тест-штамм V. parahaemolyticus, а для оценки показателя ингибиции - Е. coli и P. vulgaris.

В качестве ингибиторов роста используют теллурит калия, контроль которого описан в упомянутой выше инструкции, и препарат "Прогресс", обеспечивающий торможение роения протея и алгинолитических вибрионов.

Каждая серия ингибиторов подлежит предварительному контролю на отсутствие бактерицидного эффекта по отношению к тест-штамму V. parahaemolyticus при обеспечении ингибирующего действия по отношению к тест-штаммам P. vulgaris и Е. coli.

Препарат "Прогресс" контролируют до и после его стерилизации при 0,5 атм. или кипячения на водяной бане в течение 20 мин.

Концентрацию препарата, необходимую для добавления в среды, определяют посевом 18 - 24-часовой культуры вульгарного протея в центр пластины агара с 0,05; 0,1; 0,2% "Прогресса". В качестве контроля используют среду без добавления ингибитора. Посевы инкубируют при 37 °С в течение суток и определяют минимальную концентрацию препарата, подавляющую роение протея. На следующем этапе определяют чувствительность вибрионов тест-штамма V. parahaemolyticus к установленной ингибирующей дозе "Прогресса".

В три флакона со 100 мл 1%-й пептонной воды с "Прогрессом" добавляют по 0,1 мл взвеси, содержащей 100 клеток V. parahaemolyticus. Через 18 ч из каждого флакона высевают по 0,1 мл на пластины агара. Также поступают с контрольной средой без "Прогресса". Препарат считают пригодным, если через 18 ч выращивания в 1%-й пептонной воде с ингибитором и последующим высевом на плотную среду вырастает не менее 70% от количества в контроле.