Законодательная база Российской Федерации

"МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО САНИТАРНО - МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОМУ ИССЛЕДОВАНИЮ ПОЧВЫ" (утв. Главным государственным санитарным врачом СССР 19.02.81 N 2293-81) (извлечение)

Данное определение позволяет ограничить наблюдения первыми периодами развития популяции - лаг - фазой и фазой роста по экспоненте (логарифмический рост).

Изучение роста микроорганизмов только на первых этапах их развития, без длительных наблюдений в течение 1 - 10 суток обосновано экспериментально и является следствием прямой зависимости численной характеристики популяции от особенностей ее начального роста.

Для оценки токсичности вещества определяют время (в часах) лаг - фазы и фазы логарифмического роста исследуемого микроорганизма в присутствии вещества и в контроле. Изменение этих периодов роста указывает на токсический эффект изучаемого вещества, выражающийся в увеличении времени лаг - фазы и сокращении продолжительности фазы логарифмического роста.

Для исследования готовят на физиологическом растворе суточную взвесь тест - микроорганизма с концентрацией 1 млрд./мл. Методом убывающих разведений концентрацию микроорганизмов снижают до 200 - 300 клеток в мл. Последнее разведение готовят во флаконе с питательной средой и вносят в него изучаемое вещество в заданной концентрации. Посевы инкубируют при оптимальной для тест - микроорганизма температуре. Каждый час от момента посева и на протяжении первых часов роста определяют численность микроорганизмов общепринятым методом: глубинного или поверхностного посева на соответствующие питательные среды. По результатам ежечасного учета численности микроорганизмов строят кривую роста и определяют длительность лаг - фазы, т.е. время в часах от момента посева до первого удвоения исходной численности популяции. Для установления периода логарифмического роста рассчитывают время генерации микроорганизмов за каждый час после завершения лаг - фазы. Время генерации определяют по формуле:

где: g - время генерации, t - время наблюдений, В - число бактерий к концу опыта, в - начальное число бактерий. Период логарифмического роста устанавливают по продолжительности развития популяции с одинаковой скоростью (время генерации).

По разнице (в часах) указанных периодов роста в опыте и контроле определяют токсические для тест - микроорганизмов концентрации исследуемого вещества. Продолжительность исследования начальных периодов роста составляет 2 - 6 часов при испытании в мясо - пептонных средах и 10 - 12 часов при исследовании в воде. При необходимости исследования могут быть ограничены не только определением продолжительности лаг - фазы роста микроорганизмов.