Законодательная база Российской Федерации

"МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОРГАНИЗАЦИИ И ПРОВЕДЕНИЮ ПРОТИВОКЛЕЩЕВЫХ МЕРОПРИЯТИЙ И БИОЛОГИЧЕСКИХ НАБЛЮДЕНИЙ В ПРИРОДНЫХ ОЧАГАХ КЛЕЩЕВОГО ЭНЦЕФАЛИТА" (утв. Минздравом СССР 02.10.87 N 28-6/33)

Основной метод - учет голодных активных клещей на растительности. Как дополнительный может применяться учет клещей на скоте.

Учет проводится двумя учетчиками путем маршрутного обследования территории. Расстояние между учетчиками - 15 - 50 м. В пределах обследуемого выдела маршрут прокладывается так, чтобы он более или менее равномерно охватывал разные части выдела. Нельзя проводить учет по тропам или лесным дорогам. Перед началом учетов учетчик измеряет размер своего шага. Для этого несколько раз проходит заранее измеренное расстояние, подсчитывая шаги. Удобно считать пары шагов (под левую ногу). Число шагов или пар шагов делят на число метров в пройденном отрезке и множат на 25. Получают чисто шагов или пар шагов в 25-метровом отрезке.

Учеты проводят в специальном противоклещевом костюме (см. стр. 34). Обувь - кеды, кроссовки или туристические ботинки. При необходимости проведения учета клещей в сапогах (на переувлажненной или сильно захламленной территории) брюки с эластичным манжетом надеваются на сапоги, так как на сапоге, особенно резиновом, клещи плохо держатся, и это занижает результаты учета. Флаг шириной 60 см и длиной 80 - 100 см готовится из стандартной вафельной ткани. Длина древка выбирается по росту учетчика.

При проведении учета учетчик идет со скоростью около 2 км/час, подсчитывая шаги и протаскивая флаг рядом с собой по растительности. Флаг должен быть постоянно расправлен и не свертываться в трубку. Для предотвращения свертывания флага полезно нашивать на нем 2 поперечные складки - одну в 25 - 30 см от переднего края, вторую - в 25 - 30 см от первой. Передний край должен иметь карман для продевания древка. Привязывание переднего края флага к древку завязками, когда часть древка остается не закрытой тканью - недопустимо. Осмотр одежды и флага, а также регистрация в полевом блокноте проводятся каждые 25 м (обычно - 16 - 18 пар шагов). При высокой численности клещей осмотры проводятся дважды на 25 м. В блокнот записывают число отрезков по 25 м, число самцов и самок, собранных с одежды и флага на каждом 25-метровом отрезке. Позднее данные учета из блокнота переносятся в "Журнал учета сезонной динамики численности основных представителей энтомофауны и клещей" (форма N 374/у-87). Обобщенные данные обследований заносятся в "Журнал учета результатов рекогносцировочных обследований и работ в стационаре на территории ... на наличие иксодовых клещей-переносчиков" (форма N 371/у-87). В процессе учета клещей собирают для вирусологических исследований. Для этого заранее готовят пробирки дифференцированной влажности (см. Приложение 6) - по 2 на каждый выдел и на каждого учетчика. В одной пробирке желательно хранить не более 100 - 150 клещей, поэтому при высоком обилии клещей число пробирок соответственно увеличивают. На время учета пробирку закрывают резиновой или корковой пробкой, через которую пропущена стеклянная трубка, выходящая на 1 - 1,5 см за пределы пробки. Клещей собирают с одежды и флага пальцами и через трубочку помещают в пробирку - самцов и самок отдельно (в общей пробирке самцы копулируют с самками и после этого быстрее погибают). По окончании учета корковую или резиновую пробку заменяют ватно-марлевым тампоном и на пластыре, наклеенном на пробирку, пишут этикетку - дата и место проведения учета, фамилия учетчика. Хранить пробирки с клещами следует в холодильнике в горизонтальном положении.

Учет проводится в часы максимальной активности клещей. В ясную погоду - с момента высыхания росы (8 - 9 часов) до 11 - 12 часов и с 16 - 17 до 19 - 20 часов. В очень жаркие дни утренний учет кончают раньше, а вечерний начинают позже. В пасмурную погоду учет можно проводить все светлое время суток, начиная с 11 часов. За 1 час учетчик проходит с учетом (в зависимости от численности клещей) 1 - 1,5 км, за полный рабочий день - от 5 до 10 км. Для характеристики одного выдела следует пройти не менее 2 км.

При широком рекогносцировочном обследовании территории учеты проводят в период сезонного максимума активности клещей с поправкой в ту или иную сторону в зависимости от погодных особенностей сезона (ранняя или поздняя весна, раннее наступление жарких засушливых дней и пр.). На стационаре учеты проводят ежедекадно в течение всего периода активности клещей. При рекогносцировочных обследованиях обилие клещей в каждом типе выделов выражают средним числом особей, напавших на учетчика и флаг на 1 км маршрута. На стационаре обилие клещей в каждом типе выделов оценивают суммой ежедекадных показателей обилия за весь период активности клещей. Для этого определяют среднее за каждую декаду число клещей суммарно на учетчика и флаг на 1 км маршрута в пределах характеризуемого типа выделов и затем суммируют декадные показатели обилия. Для сравнения результатов учетов клещей на стационаре с данными рекогносцировочных обследований используют средние показатели численности клещей, полученные на стационаре в пик численности.

Для учета клещей на скоте, выпасаемом на территории природных очагов, отбирают контрольных животных и в течение всего периода обследования осматривают только этих животных. У пастуха выясняют места пастьбы скота. Желательно, чтобы эти места оставались неизменны в течение всего периода наблюдений. При высокой численности клещей, когда они встречаются на всех животных, для осмотра отбирают 10 - 15 голов, при низкой численности - 20 - 30 голов. Коров осматривают во время дневной или вечерней дойки тщательно и полностью, так как разные виды клещей предпочитают разные участки тела хозяина. С каждого животного клещей желательно собирать в отдельную пробирку. Сбор проводят глазным анатомическим пинцетом, захватывая клеща как можно ближе к коже хозяина и покачивая его из стороны в сторону для облегчения освобождения хоботка. В лаборатории клещей определяют и подсчитывают.

Сборы клещей со скота могут использоваться как дополнительный материал для ориентировочной оценки численности клещей, характеристики сезонного хода численности и для оценки роли скота в прокормлении клещей. В первом случае проводят однократные обследования по 10 - 30 голов в стаде в разных районах области (края) во второй половине мая - начале июня. Во втором и третьем случаях - регулярное ежедекадное обследование группы контрольных животных в течение всего сезона активности клещей.

Учет и отлов зверьков проводится с целью определения интенсивности прокормления личинок и нимф клещей и прогноза численности имаго. Учет мелких млекопитающих проводится с помощью ловушек-давилок на деревянной основе с проволочным сторожком. Если сторожок - металлическая пластинка, ее следует заменить проволочным крючком, который можно изготовить из канцелярской скрепки. Для удобства работы с ловушками острым ножом наискось срезают правый передний угол дощечки так, чтобы угол дужки слегка нависал над срезом и ее можно было захватить пальцем, а не ногтем.

Нагрузка на одного учетчика - 100 ловушек. Ловушки расставляют во второй половине дня, ближе к вечеру, линиями по 25 штук в каждой. Первая ловушка в линии ставится около заметного ориентира и, как и последующие, направляется приманкой в сторону следующей ловушки. Последнюю ловушку в линии поворачивают приманкой назад, в сторону предпоследней ловушки. Такой способ расстановки облегчает сбор ловушек. Расстояние между ловушками - 5 м. Расстояние между линиями - 100 - 500 м в зависимости от размеров облавливаемого выдела.

Сбор ловушек и пойманных зверьков проводится с 6 до 7 часов утра. Более позднее время сбора недопустимо, так как при подъеме температуры эктопаразиты быстрее покидают труп зверька (к 6 часам на трупе остается лишь около 50 проц. личинок и нимф таежного клеща). Чтобы максимально сохранить эктопаразитов, с трупом зверька следует проводить как можно меньше манипуляций: сначала достают бязевый мешочек, раскрывают его горловину и, осторожно взяв ловушку, опускают зверька в мешочек, стараясь не задевать за его стенки, а затем отводят дужку. Зверек падает в мешочек. Горловину мешочка загибают, складывают гармошкой и завязывают тесьмой, шпагатом или, что удобнее, резиновым обхватом. Мешочки со зверьками с одной линии связывают вместе и снаружи привязывают этикетку с указанием номера линии.

В журнале с описанием линий отмечают: номер линии, дату расстановки, номер выдела и его описание, а после сбора линии - число пойманных зверьков. Если в ловушке осталась только часть зверька (съеден или ушел, оставив хвост или лапу), его все равно считают попавшимся и он учитывается при расчете численности.

Численность мелких млекопитающих выражается числом зверьков, попавших за ночь на 100 ловушек: M = V : п x 100, где M - численность зверьков, V - число пойманных за ночь зверьков, п - число выставленных ловушек.

Трупы пойманных зверьков подвергают сначала паразитологическому осмотру, а затем - вскрытию. Вскрытие проводят с соблюдением противоэпидемического режима работы, установленного для вируса клещевого энцефалита и других возбудителей инфекционных заболеваний II группы. Все результаты записываются в специальный журнал (на развороте). В журнале указывают: номер зверька, дата, место (название или номер выдела), вид, пол, возраст, вес, длина тела, состояние семенников или матки, наличие или отсутствие эктопаразитов (наличие личинок, нимф или имаго иксодовых клещей, при необходимости - гамазовых клещей, краснотелок, блох). Если зверек не осмотрен, то в графе "примечания" это обязательно указывается, а также указывается причина (напр., "съеден"). В дальнейших расчетах индексов обилия клещей такой зверек не учитывается.

Параллельно на каждого зверька желательно завести индивидуальную карточку (перфокарты К-6, - см. Приложение 4). Карточки очень удобны при обработке материала.

Для паразитологического осмотра зверьков требуются: 2 кюветы 18 x 24 см, глазной пинцет анатомический, зубная щетка, микропробирки, штатив для микропробирок. Штатив можно изготовить из толстого куска плексигласа, высверлив в нем три ряда углублений диаметром 9 - 10 мм и глубиной 10 - 15 мм.

Мешочек с трупом зверька помещают в кювету, развязывают и постепенно выворачивают наизнанку, при этом зверек выпадает в кювету. Сначала собирают эктопаразитов с мешочка и помещают их пинцетом в микропробирку с 70-проц. спиртом. Затем против шерсти очесывают труп зверька зубной щеткой, собирая счесанных эктопаразитов пинцетом с кюветы. В заключение осматривают ушные раковины, голову, шею, раздвигая шерсть пинцетом. После осмотра к лапе или хвосту приклеивают кусочек пластыря с номером зверька. После окончания паразитологического осмотра производится зоологическая обработка трупов зверьков: определение вида, пола, возраста.

Если проводится сбор не только иксодовых клещей, но и других эктопаразитов, то разные группы членистоногих следует помещать в разные микропробирки: каждую группу эктопаразитов в отдельный ряд пробирок в штативе.

Пораженность зверьков эктопаразитами, клещами в частности, оценивают следующими показателями:

Встречаемость - доля зверьков с клещами от числа осмотренных (в проц.), обилие (индекс обилия) - среднее число клещей на одного зверька.

Встречаемость и обилие клещей на зверьках рассчитывают для каждой декады. При необходимости получения средних характеристик для месяца или сезона их рассчитывают по полученным декадным характеристикам.

Интенсивность прокормления личинок (нимф) клещей оценивают показателем прокормления личинок: Ео = C x M или нимф: Fп = N x M, где Ео(п) - показатель прокормления личинок (нимф) на зверьках, M - обилие зверьков (число зверьков) на 100 ловушко-ночей. Эта величина оценивает среднее число личинок (нимф) на зверьках на 100 ловушко-ночей. Показатели прокормления рассчитывают для каждой декады. Сумма декадных показателей прокормления за весь период паразитирования отражает запас напитавшихся клещей. Сумма показателей прокормления нимф используется для прогноза обилия имаго на следующий год (см. ниже).

Для прогноза изменения численности имаго клещей ... в следующем году необходимо иметь данные об особенностях прокормления и развития их в фазе нимфы.

Для выяснения характера развития сытых нимф и времени линьки их в следующую фазу в лесную подстилку соответствующих мест обитания помещают партии сытых нимф в мешочках-садках. Мешочек изготавливается из круглого куска мельничного газа (сита) или капрона диаметром 65 - 75 мм. В центр куска сита помещают 10 сытых нимф; края его собирают так, чтобы клещи лежали свободно, и завязывают тонкой нержавеющей проволокой или капроновой нитью. Номер мешочка, соответствующий номеру регистрации партии нимф в журнале, вкладывают в микропробирку, к пробке которой привязывают свободный конец проволоки - (нитки) от мешочка с клещами. Во избежание попадания влаги внутрь пробирки с этикеткой края ее и пробку заливают менделеевской замазкой, сургучом или парафином. Для размещения мешочков с клещами используют жестяную банку, на дне которой пробиты отверстия для стока дождевой воды, или сетчатую клетку (без крышки). Банки (или клетки) предварительно заполняют лесной подстилкой и вкапывают на глубину 10 см на том же участке леса, где оценивается ход прокормления нимф. На поверхность подстилки в банке (клетке) раскладывают мешочки с клещами. Сверху их присыпают листовым опадом слоем в 1 - 1,5 см, вровень с окружающей поверхностью лесной подстилки. Состояние клещей проверяют в конце сезона, при наступлении осеннего похолодания. Определяют число перелинявших и число оказавшихся в диапаузе нимф в партиях разных сроков питания. Линька диапаузирующих нимф при благополучной зимовке произойдет лишь в следующем сезоне, а появившиеся из них взрослые клещи будут активными через год ( ... - в основной своей массе).

Для выяснения характера развития нимф ежедекадно с 1 декады мая по II - III декады августа в подстилку помещают не менее чем по 20 напитавшихся особей. Пригодны только нимфы, полученные из природы. Такое количество сытых нимф собрать с диких прокормителей обычно невозможно. Поэтому используют нимф, полученных из личинок, накормленных в первой половине предыдущего сезона и содержавшихся в природе в садках или "акарариумах".

Голодных нимф из природы кормят на белых мышах. Начало кормления целесообразно приурочивать к первым числам каждой декады. Белую мышь с надетым на нее и зашитым воротничком из нетолстого картона или фотопленки с наружным диаметром 32 - 35 мм, внутренним - 12 - 14 мм (в зависимости от размера мыши) помещают в стеклянную банку высотой 14 - 16 см с 2 - 3 слоями фильтровальной бумаги на дне. Кисточкой на нее наносят 30 - 40 голодных нимф. Через 3 - 4 часа ей можно дать корм - небольшой кусок белого хлеба, смоченного молоком. Через сутки мышь пересаживают в клетку с сетчатым дном (или перевернутую живоловку) и ставят на подставке над кюветой с водой. Клещи после насыщения отпадают в кювету с водой. Продолжительность питания нимф в среднем составляет около 3 - 4 суток, но может продолжаться и более 5 - 6 суток. Проверку кюветы с водой нужно производить 3 раза в сутки - утром, днем и в конце рабочего дня, не допуская длительного нахождения нимф в воде, особенно в теплом помещении).

Отпавших со зверьков нимф извлекают из кюветы мягкой кисточкой, моют чистой водой, обсушивают на фильтровальной бумаге и помещают либо сразу в мешочек для закладки в природе, либо сначала в пробирку с увлажнением. Нимфы, не ползающие после подсушивания, для закладок не пригодны.

Сытые нимфы содержатся в условиях естественного освещения и в первые-вторые сутки после отпадения с хозяина должны быть помещены в природные условия.

В конце сезона, при падении температуры подстилки ниже 5 °C, в каждой из ежедекадных партий сытых клещей подсчитывают: а) число погибших нимф до линьки; б) число успевших перелинять; в) число неподвижных, начавших развитие, но не успевших перелинять; г) число оставшихся на зиму в диапаузе (подвижных).

В дальнейших расчетах к прогнозу используют ежедекадные показатели прокормления нимф мелкими млекопитающими и доли нимф, успевших перелинять в эти декады, выраженные в процентах к числу заложенных в соответствующие закладки. Способ расчета: 1) ежедекадные индексы обилия зверьков на 100 ловушко-суток (M) умножают на соответствующие индексы обилия на них нимф прогнозируемого вида (N). Произведение M x N даст показатель прокормления нимф мелкими млекопитающими (число нимф на зверьках на 100 ловушко-суток в п-ную декаду (Еп). 2) Для каждой декады по результатам развития клещей в закладках определяют долю нимф Рн, перелинявших в сезон питания. 3) Для каждой декады рассчитывают показатель прокормления нимф, успевших перелинять в сезон питания:

4) Полученные за весь сезон паразитирования нимф декадные показатели Еп суммируют, получая таким образом суммарный показатель прокормления нимф, перелинявших в сезон питания:

Этот показатель характеризует основной запас свежеперелинявших половозрелых клещей, уходящих на зимовку и способных проявить активность в следующем весенне-летнем сезоне. Если этот показатель возрос по сравнению с предыдущим годом, следует ожидать увеличения численности клещей в следующем году, если уменьшился - снижения. В годы с относительно холодным летом сроки линьки нимф на имаго могут быть сдвинуты на поздние сроки. В такие годы свежеперелинявшие имаго могут не успеть до холодов пройти стадию послелиночного доразвития и в зимний период обычно погибают. В результате прогноз может показаться несколько завышенным. При регулярных проверках закладок и установлении сроков массовой линьки наблюдатель может своевременно внести в прогноз уточнение, уменьшив ошибку.

Следует также иметь в виду, что в районах, где нимфы в основном развиваются с диапаузой, этот упрощенный метод прогноза не пригоден.

В таких районах для прогноза должны использоваться показатели прокормления нимф не за один, а за два сезона. Выявляются такие районы путем таких же наблюдений за сытыми нимфами в закладках, т.к. других способов, позволяющих дифференцировать ареалы клещей по характеру из развития, пока нет.