Законодательная база Российской Федерации

"БЕЗОПАСНОСТЬ РАБОТЫ С МИКРООРГАНИЗМАМИ I-II ГРУПП ПАТОГЕННОСТИ. САНИТАРНЫЕ ПРАВИЛА И НОРМЫ. СП 1.2.011-94" (утв. Постановлением Госкомсанэпиднадзора РФ от 04.05.94 N 011)

3.5.1. Все манипуляции с культурами мицелиальной фазы, а также изучение выживаемости грибов во всех фазах проводят в герметичном боксе, с фильтровентиляционной системой, включающей фильтрацию воздуха, поступающего в бокс и выходящего из него через фильтры из тканей Петрянова или другие высокоэффективные стерилизующие фильтры. Воздух, выходящий из бокса, кроме того проходит фильтр из пропитанной раствором лизола стекловаты или 10% раствор лизола (в сосуде), или поступает в общую фильтровентиляционную систему, на выходе которой установлены фильтры из ткани Петрянова. Помещение, где находится бокс, максимально герметизируют.

3.5.2. За 15 мин. до начала работы в боксе включают бактерицидные лампы и вытяжную систему вентиляции бокса. Во время загрузки бокса вытяжную систему выключают, а затем после загрузки включают снова. Работу вакуум-насоса контролируют по объемной скорости движения воздуха с помощью реометра или манометром, определяющим в боксе вакуум, который должен быть равным 2-5 мм водяного столба (19,62-49,05 Па).

3.5.3. В целях исключения попадания возбудителей грибов в помещение, где находится бокс, проверяют его герметичность при установке, а затем не реже одного раза в квартал; бактериологическое исследование воздуха за фильтром проводят один раз в месяц; лизол, находящийся в сосуде и пропитывающий стекловату, меняют один раз в 7-10 дней, а стекловату - по мере ее уплотнения.

Если во время работы в боксе прекратился отсос воздуха из него, работу немедленно прекращают.

3.5.4. Посевы мицелиальных культур в боксах делают после предварительного внесения в пробирки или матрацы физиологического раствора или бульона. При производственных смывах мицелиальных культур жидкость в матрацы вносят через пробки шприцом с длинной иглой. Посевы инкубируют в металлических емкостях.

3.5.5. При работе с мицелиальными фазами грибов во избежание заражения аэрогенным путем агаровые пластинки с посевами выдерживают в термостате не более 5 суток (до начала спороношения). Матрацы, пробирки с посевами мицелиальной фазы грибов вне бокса не открывают.

3.5.6. Просмотр посевов с мицелиальными фазами грибов проводят в боксовых комнатах в костюме IV типа с ватно-марлевой маской.

Работу с дрожжевыми фазами грибов проводят в боксовой комнате в костюме III типа с маской. Серологические исследования - в костюме IV типа.

3.5.7. Для проведения подсчета клеточных элементов в камере Горяева суспензии грибов либо автоклавируют, либо в них для ускорения подсчета) добавляют формалин до 10% и выдерживают в термостате 2 часа при 37°С.

3.5.8. С целью получения антигенов, вакцин и проведения других работ выращенную грибницу обеззараживают:

- автоклавированием при 0,5 атм в течение 30 мин;

- добавлением формалина до конечной концентрации 0,5% (дрожжевые формы возбудителей гистоплазмоза, бластомикозов, мицелиальные фазы всех возбудителей).

3.5.9. Для проверки грибной массы или фильтратов на стерильность их засевают по 0,5 мл в пробирки с сахарным мясо-пептонным агаром и бульоном, твердой и жидкой средой Сабуро, сусло жидкое и сусло-агар (по 4 пробирки каждой среды). Взвеси, убитые формалином, предварительно разводят в 20-100 раз физиологическим раствором или бульоном. Посевы выдерживают в течение 10 суток при 28° и 37°С. До получения результатов контроля взвеси и фильтры хранят при 4°С.

3.5.10. Исследование проб почвы, гнезд грызунов, помета птиц и т.п. проводят в боксе с фильтровентиляционной системой.

3.5.11. При заражении лабораторных животных место введения материала обрабатывают 1% настойкой йода (йодоната).

3.5.12. При проведении серологических исследований обеззараживание материала проводят путем автоклавирования или добавлением формалина до конечной концентрации 0,5-1 % с последующим выдерживанием не менее 2 суток при 37°С и проверкой на стерильность. Сыворотки перед постановкой серологических реакций прогревают при 56°С 30 мин., а затем добавляют к ним тиомерсал (мертиолят) до концентрации 1:10000 и исследуют не ранее чем через 24 часа.