Законодательная база Российской Федерации

"ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА ХОЛЕРЫ. МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ. МУК 4.2.2218-07" (утв. Роспотребнадзором 31.05.2007)

Приложение 1
(рекомендуемое)

<*> Регистрационный номер проставляют в лаборатории.

<**> Указать, принимал(а) ли антибиотики (если да - то какие, когда и сколько).

Приложение 2
(рекомендуемое)

<*> Регистрационный номер проставляют в лаборатории.

Приложение 3
(обязательное)

Приложение 4
(обязательное)

Приложение 5
(рекомендуемое)

Принцип метода заключается в том, что при просмотре колоний различных микробов под малым увеличением микроскопа или лупы при освещении их пучком света, косо падающим на поверхность агара, колонии приобретают способность светиться и кажутся окрашенными.

К стереоскопическому микроскопу МБС-2 или МБС-1 приспосабливают устройство для получения узкого пучка света и зеркало от микроскопа на подвижном шарнире для освещения чашки снизу под углом 45 - 50°.

Чашки с посевами просматривают после 12 - 18 ч инкубации. При величине угла падения луча света к поверхности агара в 40 - 50° колонии вибрионов по своей окраске заметно отличаются от других микроорганизмов.

Цвет колоний, выросших на щелочном агаре, при косом освещении:

Приспособления для просмотра колоний в косо проходящем свете.

1. Столик стереоскопического микроскопа МБС-1 или МБС-2 заменяют специальным приспособлением для освещения чашки снизу под углом 45 - 50°. Источником света служит осветитель от микроскопа, на который надевают кожух с отверстием диаметром 5 мм против спирали лампочки для получения узкого пучка света. Узкий пучок света направляют в центр вогнутого зеркала, которое перемещается на подвижном шарнире поворотом винта в зависимости от необходимости угла падения света. Угол вычисляют по соотношению расстояния от зеркала до чашки, которое меняется произвольно, и расстояния от чашки до поверхности стола, остающегося неизменным.

Для удобства исследования осветитель и зеркало можно вмонтировать в ящик со стеклянной крышкой, на которую помещают чашку с посевом. Это дает возможность быстро находить нужный угол падения света, передвигая зеркало поворотом винта по вмонтированной шкале.

2. Приспособление, смонтированное из основных узлов стереоскопического микроскопа БМС-1 и прибора для счета колоний.

Из раструба верхней крышки прибора для подсчета колоний удалить оба стекла вместе с упорным кольцом и снять верхнюю крышку. Из скобы передней панели вывинтить вертикальную ось, после чего убрать диск со светофильтрами. Освободить два винта, прикрепляющие патрон лампочки освещения к кронштейну на задней панели. В крышку снизу вставить вертикальную штангу от узла лупы с таким расчетом, чтобы в рабочем положении прибора муфта с прижимным винтом оказалась на дне под кронштейном импульсного счетчика. В муфту зажать держатель с угловыми губками (из комплекта лабораторного штатива), предварительно укороченный до 110 мм. Держателем закрепить патрон с лампочкой в вертикальном положении. Крышку фиксировать винтами на своем обычном месте.

Штатив микроскопа МБС-1 вместе с бинокулярной насадкой отсоединить от столика и установить непосредственно на корпус прибора для счета колоний так, чтобы 3 сферических ножки основания штатива охватили раструб крышки прибора, а окно основания было обращено к наблюдателю. Подлежащие к просмотру чашки с посевами устанавливают над открытым окном. Нужную освещенность и угол падения света находят изменением положения лампы, которое достигается поворотом штанги, после чего последнюю фиксируют цанговым зажимом.

Приложение 6
(рекомендуемое)

Приложение 7
(рекомендуемое)

Приложение 8
(рекомендуемое)

<*> Таксономическое определение, токсигенность с указанием метода определения, чувствительность к антибиотикам (значения МПК, мкг/м); при необходимости дифференциации от других видов патогенных вибрионов добавляют тесты: рост без NaCl, расщепление салицина, дульцита, целлобиозы, тест на бета-галактозидазу, наличие нитратредуктазы.

Приложение 9
(обязательное)

<*> Патогенный биологический агент.

<**> Типичность; при атипичности указать отличительные признаки.

<***> Уничтожен (дата, N акта); передан в коллекцию, центр и т.д. (дата, N акта).

Приложение 10
(обязательное)

                          Паспорт штамма\r\n \r\nВид микроба __________________________ Штамм N ___________________\r\nФ.И.О. ______________________________ возраст ____________________\r\nместо жительства больного или вибриононосителя (подчеркнуть) _____\r\n__________________________________________________________________\r\n   (республика, область, район, населенный пункт, улица, N дома\r\n                           и квартиры)\r\nНаименование объекта _____________________________________________\r\n                                  (река, озеро и т.п.)\r\nнаименование стационарной точки __________________________________\r\n                                     (зона сан. охраны, место\r\n                                     сброса сточных вод и т.п.)\r\nсточные воды _____________________________________________________\r\n                    (в очаге, коллектор, очистные сооружения\r\n                          до или после очистки и т.п.)\r\nдругие объекты ___________________________________________________\r\n                                     (указать)\r\nс указанием территории ___________________________________________\r\n                    (республика, область, район, населенный пункт)\r\nДата забора материала ___________ Дата выделения культуры ________\r\nКультуру выделил(а) ______________________________________________\r\n                             (Ф.И.О. врача, учреждение)\r\nКультуру подтвердил(а) ___________________________________________\r\n                             (Ф.И.О. врача, учреждение)\r\n \r\n                      Характеристика штамма\r\n \r\n1. Морфология клеток _____________________________________________\r\nТинкториальные свойства __________________________________________\r\n2. Подвижность ___________________________________________________\r\n3. Культуральные свойства: на 1% п.в. ____________________________\r\nна щелочном агаре ________________________________________________\r\n4. Проба на оксидазу _____________________________________________\r\n5. Лизиндекарбоксилаза ___________________________________________\r\nорнитиндекарбоксилаза ___________ аргининдигидролаза _____________\r\n6. Расщепление:   глюкозы    в   среде    Хью-Лейфсона   (аэробн./\r\nанаэробн.) _______, сахарозы ________, маннозы ________, арабинозы\r\n________, маннита _________, инозита _________, лактозы _________,\r\nкрахмала _______\r\n7. Протеолитическая активность ___________________________________\r\n8. Агглютинабельность холерными сыворотками: (указать серии и титр\r\nсывороток):\r\nО1 ________________, Огава _______________, Инаба _______________,\r\nРО _______________, О139 _________________________________________\r\n9. Реакция с холерными О1 люминесцирующими антителами ____________\r\n10. Чувствительность к холерным фагам: классическому ____________,\r\n                   +             -\r\nэльтор _______, ctx  _______, ctx  _______, ТЭПВ (1 - 7) _________\r\n11. Гемолитическая активность по Грейгу __________________________\r\n12. Реакция гемагглютинации ______________________________________\r\n13. Чувствительность к полимиксину В 50 (ед./мл) _________________\r\n14. Токсигенность:\r\nкомплексным методом (ctx фаги и гемолиз) _________________________\r\nна кроликах-сосунках _____________________________________________\r\nПЦР ______________________________________________________________\r\nДНК-зондирование _________________________________________________\r\n15. Антибиотикограмма\r\n 

 N
п/п

   Препарат 

    Значение

               Результат 

 МПК,
мкг/мл

  зона 
ингибиции
роста, мм

чувствительный

промежуточный

устойчивый

1 

Доксициклин 

2 

Тетрациклин 

3 

Левомицетин 

4 

Ципрофлоксацин

5 

Рифампицин 

6 

Нитрофурантоин

7 

Ко-тримоксазол

8 

Гентамицин 

9 

Ампициллин 

10 

Цефотаксим 

Другие 
(вписать) 

 \r\n16. Другие свойства ______________________________________________\r\n17. Среда хранения _______________________________________________\r\nПодпись врача ____________________________________________________\r\n \r\nПримечание.\r\n1) В графе 8 указывать: отр. или до титра; 1/2 титра и т.д.\r\n2) В графе 10 указывать: до титра; 1/2 титра и т.д.\r\n