Законодательная база Российской Федерации

"ГОСУДАРСТВЕННЫЕ ИСПЫТАНИЯ И РЕГИСТРАЦИЯ НОВЫХ МЕДИЦИНСКИХ ИММУНОБИОЛОГИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ. САНИТАРНЫЕ ПРАВИЛА. СП 3.3.2.561-96" (утв. Постановлением Госкомсанэпиднадзора РФ от 31.10.96 N 33)

При проведении настоящего испытания формируют две группы животных: получающих испытуемый препарат и соответствующий объем дистиллированной воды (контрольная группа).

Требования к дозе испытуемого препарата, пути его введения, экспериментальным животным и их количеству, методам статистической обработки те же, что и при постановке гексеналовой пробы.

Тиосемикарбазид (ТСК) или коразол вводят через 24-48 ч и 14 сут. после вакцинации. При постановке судорожных проб следует учитывать, что шум в помещении, резкие движения оператора и животных могут спровоцировать возникновение судорог. В связи с этим, после введения ТСК (коразола) животных следует содержать изолированно, помещая в прозрачные пластмассовые клетки, разделенные на мелкие отделения, или в стеклянные банки.

Введение коразола или ТСК интактным животным вызывает развитие судорог различного характера: клонические, тонические, клонико-тонические. Регистрируют время введения судорожного агента каждому животному, время развития каждого судорожного приступа, характер судорог, время гибели. Зная время введения вещества, вызывающего судороги, и наступления гибели мыши, определяют длительность жизни каждого животного.

2.1. Проба с ТСК

Раствор ТСК на дистиллированной воде вводят внутрибрюшинно в объеме 0,2 мл. Перед началом исследования определяют дозу препарата, которая должна вызвать у интактных мышей развитие судорожных приступов и последующую гибель почти всех животных (ЛД95). При этом первый судорожный приступ должен развиться через (40+5 мин), а гибель основного числа животных должна наступить через 70-90 мин. Как правило, эта доза находится в пределах от 18 до 25 мг/кг массы.

Регистрацию времени введения ТСК каждому животному, времени развития судорог и гибели осуществляют с помощью секундомера. За животным наблюдают в течение 3 ч.

Определяют среднюю длительность жизни мышей опытной и контрольной групп и достоверность различий между показателями.

2.2. Коразоловая проба

Раствор коразола на дистиллированной воде вводят подкожно в объеме 0,2 мл. Перед началом исследования определяют дозу препарата, которая должна вызывать у интактных мышей развитие судорог и последующую гибель почти всех животных. Как правило, эта доза находится в пределах от 90 до 100 мг/кг массы.

В отличие от пробы с ТСК при использовании коразола приступы судорог развиваются уже в первые минуты после введения препарата, а гибель основного числа животных наступает в течение 30 мин.

Регистрацию времени введения коразола, развития судорог и гибели животных проводят так же, как после введения ТСК. За животными наблюдают в течение 60 мин. Определяют среднюю длительность жизни мышей опытной и контрольной групп и достоверность различий между показателями.