Законодательная база Российской Федерации

"ГОСУДАРСТВЕННЫЕ ИСПЫТАНИЯ И РЕГИСТРАЦИЯ НОВЫХ МЕДИЦИНСКИХ ИММУНОБИОЛОГИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ. САНИТАРНЫЕ ПРАВИЛА. СП 3.3.2.561-96" (утв. Постановлением Госкомсанэпиднадзора РФ от 31.10.96 N 33)

Государственные приемочные испытания диагностических питательных сред проходят в два этапа:

- 1-й этап - лабораторные испытания диагностических питательных сред;

- 2-й этап - клинико-эпидемиологические испытания (полевые испытания) диагностических питательных сред.

11.1. Первый этап приемочных испытаний включает экспертизу НТД и оценку качества экспериментально-производственных серий препарата с помощью музейных штаммов соответствующих микроорганизмов в зависимости от назначения среды. Препарат также характеризуют по физикохимическим показателям.

Изучение качества сред на первом этапе проводят с помощью физико-химических (внешний вид, остаточная влажность, растворимость, прозрачность и цветность раствора, рН, хлориды, аминный азот, прочность студня (для плотных сред) и биологических показателей.

11.1.1. Физико-химические показатели определяют с использованием методик, изложенных в ФС 42-344ВС-90 ("Физикохимические, химические, физические и иммунохимические методы контроля медицинских иммунобиологических препаратов") и Методических указаниях по методам контроля МИБП (в печати).

11.1.2. К биологическим показателям, характеризующим качество сред в зависимости от их назначения, относятся следующие.

11.1.2.1. Чувствительность - определяют по максимальному разведению культуры, при котором на всех засеянных чашках (пробирках) обнаруживается рост (все группы питательных сред).

11.1.2.2. Эффективность - по увеличению микробной массы в среде через соответствующий срок инкубации посевов (среды для культивирования, обогащения микроорганизмов).

11.1.2.3. Показатель стабильности основных свойств микроорганизма - по отсутствию проявления атипичных свойств (морфологических, биохимических, серологических, фаголизабельных и др.) при росте культуры (все группы питательных сред).

11.1.2.4. Дифференцирующие свойства - по выраженности отличительных признаков (структурных особенностей колоний, их окраски, изменения цвета и др.) различных микробов (дифференциальные среды, питательные среды для идентификации микроорганизмов).

11.1.2.5. Показатель ингибиции - по степени подавляющего воздействия на постороннюю микрофлору (среды для выделения микроорганизмов, их хранения, дифференциальные и накопительные среды).

11.1.2.6. Скорость роста - по минимальному времени инкубации посевов, достаточному для выявления роста культур (все группы питательных сред).

11.1.2.7. Показатель прорастания микробных клеток - по отношению числа колоний, образовавшихся на испытуемой среде к числу колоний на контрольной среде, обеспечивающей выявление максимального числа жизнеспособных клеток (все группы питательных сред).

11.1.2.8. Выбор совокупности показателей, характеризующих диагностическую эффективность среды и методов их определения, осуществляют, исходя из назначения среды и в соответствии с "Методическими рекомендациями к контролю питательных сред по биологическим показателям" (М., 1980).

11.2. По результатам экспертизы документов и при положительной оценке на 1-м этапе качества образцов экспериментально-производственных серий препарата решением Комитета МИБП, рекомендуется проведение второго этапа полевых испытаний питательных сред в соответствии с программой, согласованной с ГИСК им.Л.А.Тарасевича и утвержденной тем же Комитетом.

11.2.1. Правила проведения полевых испытаний зависят от назначения питательной среды.

11.2.1.1. Среды, предназначенные для работы с чистыми культурами (например, среды идентификации) микроорганизмов, должны оцениваться с помощью широкого набора музейных и свежевыделенных штаммов.

11.2.1.2. Питательные среды, предназначенные для работы с клиническим материалом (например, среды для выделения конкретного возбудителя), должны быть испытаны с помощью музейных и свежевыделенных штаммов соответствующих микроорганизмов (1-я стадия) и при посевах клинического материала в условиях деятельности практических лабораторий (2-я стадия).

11.2.2. В случае отсутствия условий для проведения 2-й стадии исследований допускается проведение оценки образцов питательных сред в опытах, имитирующих естественные условия. В этих случаях для посевов используют естественные материалы от здоровых лиц и объектов внешней среды (традиционно исследуемые при диагностике соответствующих инфекций), в которые вносится культура возбудителя в количестве, моделирующем ее концентрацию при естественном заражении.

11.3. Испытание образцов питательной среды по всем показателям на всех стадиях проводят параллельно с контрольной средой, аналогичной по своему назначению и лучшей по качеству. При отсутствии одной среды-аналога используют несколько сред, в совокупности характеризующих свойства нового препарата. При отсутствии сухих питательных сред промышленного изготовления в качестве контрольных используют среды лабораторного изготовления. В этом случае в Программе испытаний указывается состав среды, способ ее изготовления, условия и сроки хранения.

11.4. Оценку питательной среды на первой стадии испытания проводят с помощью ранее названных биологических показателей, выбранных в зависимости от назначения среды и характеризующих ее диагностическую эффективность ("Методические рекомендации к контролю питательных сред по биологическим показателям", М., 1980).

11.5. На второй стадии испытания при использовании клинического материала питательные среды следует оценивать по показателю высеваемости, определяемого отношением числа положительных находок возбудителя к числу исследуемых проб в процентах. Учитывают также скорость роста культуры на среде; в случае испытания плотных сред - количество "подозрительных" колоний (можно в условных единицах), позднее подтвержденных как положительный результат; стабильность основных биологических свойств выделенного микроорганизма. Для питательных сред с ингибирующими свойствами отмечают эффективность подавления посторонней микрофлоры на среде.

11.6. Испытания проводят на базах научно-исследовательских институтов соответствующего профиля, лабораторных центрах, бактериологических лабораториях центров санитарно-эпидемиологического надзора и инфекционных больниц. Испытания в практических лабораториях проводят на территориях наиболее активных эпидемических очагов в период наибольшей высеваемости возбудителя соответствующей инфекции на данной территории. Число опытных баз определяется в зависимости от общего объема запланированных исследований и от пропускной способности лаборатории в соответствующий период.

11.7. При выборе материала, подлежащего посеву на испытуемые среды, следует исходить из возможности получения большего числа положительных находок искомого возбудителя при меньших объемах исследований. Для этого в опыт берут те контингенты или объекты, при исследовании которых па данной территории регистрируется наибольшая частота высеваемости искомого возбудителя. Как правило, это больные с соответствующим диагнозом (или с подозрением). Нецелесообразно в опыте исследовать материал от здоровых лиц, обследуемых с профилактической целью.

11.8. Одним из важных моментов во время проведения испытаний является взятие материала в объеме, достаточном для посева на обе среды: опытную и контрольную, и соблюдение принципа равнозначности посева материала на опытную и контрольную питательные среды.

11.9. Посев материала на среды и последующую идентификацию выделенных культур проводят в соответствии с методиками, изложенными в МУ, инструкциях, приказах по диагностике заболеваний, вызываемых соответствующими микроорганизмами. В этом случае в Программе испытаний достаточно сделать ссылку на документ. Если в Программе испытаний предусмотрена другая методика исследования, то ее необходимо изложить полностью.

11.10. По окончании испытаний проводится статистическая обработка результатов с определением средних величин, стандартных отклонений, вычислением коэффициента вариации, определением доверительных интервалов и достоверности различий между опытными и контрольными средами.

11.11. Испытание питательных сред должно предусматривать также определение временных затрат труда специалистов практических лабораторий на приготовление опытной и контрольной сред.

11.12. При испытании питательных сред необходимо вести протоколы, рабочие журналы, примерные образцы которых представлены в "Методических указаниях к проведению испытаний диагностических питательных сред" (М., 1982).