Законодательная база Российской Федерации

"ГОСУДАРСТВЕННЫЕ ИСПЫТАНИЯ И РЕГИСТРАЦИЯ НОВЫХ МЕДИЦИНСКИХ ИММУНОБИОЛОГИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ. САНИТАРНЫЕ ПРАВИЛА. СП 3.3.2.561-96" (утв. Постановлением Госкомсанэпиднадзора РФ от 31.10.96 N 33)

3.1. Методика орального введения белым мышам, морским

свинкам, кроликам и обезьянам орального таблетированного МИБП

Принцип метода состоит в обеспечении контакта МИБП со слизистой ротовой полости в течение 2-3 мин.

Нарезают губку или другой пористый материал кусочками объемом: для белых мышей - 0,3-0,5 см3, морских свинок и кроликов - 0,5-1,0 см3, обезьян - 1-2 см3.

Таблетку измельчают и растворяют в таком количестве дистиллированной воды, чтобы 1 доза препарата для белой мыши или морской свинки содержалась в 0,5 мл, а для кролика - в 1 мл суспензии. Полученную суспензию сорбируют губкой, фиксированной в кровоостанавливающем зажиме. Мышей и морских свинок фиксируют в руке. Кроликов помещают в ящик для иммобилизации. Обезьян фиксируют за шею руками. Затем вводят губку в ротовую полость животного и удерживают ее в течение 2-3 мин. Все манипуляции выполняют осторожно, чтобы не повредить слизистую ротовой полости.

3.2. Методика энтерального введения кроликам и обезьянам

жидкой формы МИБП

Принцип метода состоит во введении жидкого препарата на неповрежденную слизистую с помощью трубки, проведенной через верхние отделы желудочно-кишечного тракта в двенадцатиперстную кишку.

У кроликов и обезьян натощак удаляют волосяной покров на участке, расположенном ниже мечевидного отростка по срединной линии живота, размером 5х15 см. У обезьян эту процедуру проводят после достижения полного наркоза.

Кроликов фиксируют на операционной доске животом вверх и наркотизируют до исчезновения болевой чувствительности. Обезьян фиксируют на операционной доске после проведения наркоза. Подготовленное операционное поле обрабатывают 3%-ным спиртовым раствором йода и ограничивают его стерильными салфетками с помощью корнцангов. После проведения верхнесрединной лапаротомии через разрез извлекают из брюшной полости желудок с прилежащим участком двенадцатиперстной кишки. Затем через рот, пищевод и желудок вводят в двенадцатиперстную кишку на глубину 2-4 см газоотводную трубку, которую фиксируют пальцами в области перехода из желудка в кишечник. Все манипуляции выполняют через стенку желудка. После этого другой лаборант через губку при помощи шприца вводит 1-2 мл жидкой вакцины с последующим промыванием трубки физиологическим раствором объемом 20-30 мл. Желудок и кишечник помещают в брюшную полость и вводят в нее 2 мл раствора антибиотиков (100-200 тыс.ед/мл). Операционную рану послойно зашивают. Все манипуляции выполняют с помощью стерильных инструментов и материалов с соблюдением правил асептики и антисептики.

Первое кормление животных допускается на следующий день после операции. Продолжительность наблюдения за животными - до 30 сут (в зависимости от цели исследования). Отход животных во время операции и в период наблюдения составляет не более 5% и обусловлен оперативным вмешательством.

3.3. Методика энтерального введения кроликам и обезьянам

Животных усыпляют эфирным наркозом. При вскрытии и осмотре внутренних органов отмечают состояние серозных покровов и содержимое полостей. Определяют, сравнивая с контрольной группой животных, массу, цвет, степень кровонаполнения органов, наличие гемодинамических нарушений. Вырезают кусочки из внутренних органов подопытных и контрольных животных (головного и спинного мозга, легких, печени, почек, надпочечников, желудка, тонкого и толстого кишечника, поджелудочной железы, тимуса, зпифиза, щитовидной железы, селезенки, лимфатических узлов разной локализации). Спинной мозг извлекают из позвоночника после фиксации.

Фиксацию материала проводят в 10-12%-ном растворе формалина с последующей промывкой, проводкой через спирты и заливкой в парафин. При резке на каждое стекло помещают не менее 2-х срезов, которые окрашивают гематоксилинэозином. Для уточнения характера выявленных изменений могут быть использованы гистохимические и другие морфологические методы исследования (окраска на фибрин, липиды, мукополисахариды и т.д.).

При изучении препаратов обращают внимание на наличие изменений в системе микроциркуляции: признаки перераспределения крови с депонированием ее в паренхиматозных органах; явления стаза и плазмостаза; агрегацию эритроцитов в капиллярах и тромбообразование; повышение проницаемости стенок сосудов с развитием геморрагий, плазморрагии, мукоидной, фибриноидной дезорганизации, фибриноидного некроза.

Кроме микроциркуляторных нарушений выявляют также наличие дистрофических и воспалительных изменений во внутренних органах.

При изучении легких отмечают состояние бронхиальной системы (бронхоспазм, отек стенок, десквамация слизистой оболочки, наличие кровоизлияний и воспалительной реакции), обращают внимание на признаки эмфиземы, циркуляторных и воспалительных изменений. В сердце изучают межуточную ткань миокарда (стек стромы, мукоидное набухание, воспалительная инфильтрация, продуктивная реакция), саркоплазму (дискоидный распад миофибрилл, миоцитолиз), эндокард, перикард (отек, клеточная реакция). В печени и почках определяют вид и выраженность дистрофических и воспалительных изменений. Описывают характер изменений в тимусе, селезенке, лимфатических узлах разной локализации, костном мозге. В ЦНС исследуют состояние микроциркуляторного русла, а также нейронов в коре, подкорковых образованиях, гипоталамусе, стволе и спинном мозге.

Приложение 2

Индивидуальная карта привитого

Приложение 3